重组胶原蛋白的细胞增殖试验
1. 细胞增殖试验原理
用重组胶原蛋白包被细胞培养板或其他经验证的方法，采用合适的预期临床应用时可能接触的细胞(如皮肤成纤维细胞)，接种密度在50%左右，常规培养2天~3天后检测细胞增殖情况，考察重组胶原蛋白包被梯度浓度的剂量-效度关系。
2. 细胞增殖试验方法
具体检测方法可采用MTT法、CCK-8法等进行检测(按盟试剂盒的操作说明进行)，采用无承组胶原蛋白包被的细胞培养板作为对照，分析细胞增。如需要，可采用组织提取胶原蛋白国家标准品作为对照材料，对比分析重组胶蛋白的促细胞增殖作用。
3. 细胞增殖试验步骤
（以MTT法为例）
1、消化NIH3T3细胞制备成单细胞悬液，细胞悬液离心（200 g，3 min），调整细胞密度为1×105个/mL的细胞悬液；接种到96孔培养板中，每孔100 µL，培养24 h。
2、弃去原培养液，分别加入100 µL不同浓度的试验样品浸提液（100%、 75%、50%、25%）、空白对照液、阳性对照（100%）和阴性对照液（100%），培养24 h。每组做6个平行。
3、24 h后，取出96孔板先做细胞形态学观察，弃去原培养液，每孔加50 µL MTT（1 mg/mL），培养2 h，弃去上清，每孔加入100 µL异丙醇溶解结晶。
4、在酶标仪上以570 nm为主吸收波长，650 nm为参考波长测定吸光度值
熠品实验室积累了大量的案例经验，典型的有：重组胶原蛋白注射液、水凝胶膜、陶瓷补片、聚乳酸膜等
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